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熒光PCR凍干及蛋白質(zhì)類凍干保護(hù)劑

更新時(shí)間:2020-08-08      點(diǎn)擊次數(shù):2890

常用的凍干保護(hù)劑種類有多輕基化合物、糖、蛋白質(zhì)、聚合物、氨基酸、鹽、胺、表面活性劑等。蛋白質(zhì)類凍干保護(hù)劑可分為兩種 : 一種是蛋白質(zhì)藥物自身,另一種為外來(lái)蛋白質(zhì)。 一些蛋白質(zhì)經(jīng)凍融后的活性直接和蛋白質(zhì)的起始濃度有關(guān) , 起始濃度升高有時(shí)會(huì)促進(jìn)蛋白質(zhì)的復(fù)性一種常用的外來(lái)蛋白質(zhì)類保護(hù)劑為血清白蛋白 , 它是一個(gè)經(jīng)典 、優(yōu)良的蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑 。 例如 , 冷凍時(shí) , 1 % 牛血清白蛋白可使溶液的活性不受損失 ;人血清白蛋白則在更低濃度 ( 0 . 0 5 % 一 0. 1 % ) 時(shí)也能有效阻止蛋白質(zhì)表面的吸附,對(duì)凍干過程中多數(shù)蛋白都具有保護(hù)作用。當(dāng)干燥蛋白質(zhì)藥物時(shí)保護(hù)劑緊密地包裹相鄰近的蛋白質(zhì)分子形成一種在結(jié)構(gòu)上與冰相似 的碳水化合物玻璃體,由于私度很高其擴(kuò)散系數(shù)很低蛋白質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)能力減某一蛋白質(zhì)的保護(hù)作用通常有一個(gè)好的使用濃度( 或使用量 ) , 故選擇保護(hù)劑時(shí)還要合理選擇使用量。在做溶液凍干時(shí),溶液濃度高或低對(duì)制干燥過程中藥液表面首先品的影響。溶液濃度過高時(shí):被干燥形成結(jié)構(gòu)致密的表層。該表層孔隙細(xì)小,透氣性差,里面的水分難以穿過表層,因而沿瓶壁上升,導(dǎo)致制品離壁、萎縮;此外,濃度過高時(shí),藥液在干燥過程凍干中容易結(jié)塊,所得制品外觀不均勻。濃度過低時(shí):機(jī)械強(qiáng)度低,在包裝及運(yùn)輸過程后制品結(jié)構(gòu)比較疏松甚至變成粉末,影響制品的外觀。分享熒光PCR試劑凍干示例:(1)將熒光PCR擴(kuò)增緩沖液、引物、探針、熱啟動(dòng)Taq酶、UNG酶、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP、凍干保護(hù)劑按照配方進(jìn)行混合;(2)凍干保護(hù)劑,可選用:甘油、海藻糖、蔗糖、甘露醇、PEG、PVP、DTT、牛血清白蛋白、吐溫100、甲酰胺、氨基酸等。(3)將上述混合液灌裝至PCR擴(kuò)增管或者八聯(lián)管中。(4)進(jìn)行凍干。(5)出倉(cāng)進(jìn)行測(cè)試。(6)配方修正。

型號(hào)

Pilot3-6ES

Pilot5-8ES

Pilot7-12ES

Pilot10-15ES

規(guī)格

箱阱分離 GMP

箱阱分離 GMP

箱阱分離 GMP

箱阱分離 GMP

凍干面積

0.35

0.525

0.8

1.0

φ22西林瓶裝量(20ml

≥900

≥1170

≥1500

≥2100

板層尺寸(mm

350*500

350*500

350*570

350*570

冷阱溫度 (空載)

-85

真空度 (空載)

<3Pa

板層溫度(空載)

-55

板層制冷方式

硅油循環(huán)

捕水能力

6L

8L

12L

15L

凍干效率

3L/24H

5L/24H

7L/24H

10L/24H

板層間距

50mm

50mm

50mm

50mm

壓塞

電動(dòng)

壓縮機(jī)功率

2*1.5HP

2*2HP

2*3HP

2*3HP

真空泵

6L/S

整機(jī)尺寸 (約)

760×1340×1700

760×1340×1700

760×1440×1800

760×1440×1800

 

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